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更新時間：2025-04-09

兔骨細胞

方法簡介：

實驗室分離的兔骨采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的兔骨經骨鈣素免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：不增殖；不傳代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔骨體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；

　　4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

商品屬性：

細胞簡介：

兔骨分離自骨組織；骨組織的細胞成分包括骨原細胞、成骨細胞、骨細胞和破骨細胞。只有骨細胞存在于骨組織內，其他三種細胞均位于骨組織的邊緣。骨細胞（Osteocyte）是人體骨骼中最主要的細胞成分。在成年人骨骼中，骨細胞占細胞總數(shù)量的90%～95%，大約是成骨細胞數(shù)量的20倍。骨細胞生長在骨骼內部的骨基質中。骨細胞的細胞體呈梭形或類圓形，位于基質構成的骨陷窩內。與神經細胞類似，每個骨細胞具有大量向外延伸的突觸，而這些突觸均位于由骨基質構成的骨小管結構中。通過這些突觸，骨細胞能夠與骨表面的細胞、周圍其它的骨細胞進行“交流"。普遍認為，骨細胞起源于成骨細胞。在骨形成的終末階段，成骨細胞將可能有3種不同的歸宿：分化成為骨細胞、轉移至骨表面成為暫不活動的成骨細胞、進入程序死亡過程（凋亡）。骨細胞為扁橢圓形多突起的細胞，核亦扁圓、染色深。胞質弱嗜堿性。電鏡下，胞質內有少量溶酶體、線粒體和粗面內質網，高爾基復合體亦不發(fā)達。骨細胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內。相鄰骨細胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質中，骨細胞胞體所占據(jù)的橢圓形小腔，稱為骨陷窩，其突起所在的空間稱骨小管。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連。骨陷窩和骨小管內均含有組織液，骨細胞從中獲得養(yǎng)分。

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

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